本文转自：中国医药报
□吕凤
皮肤细胞培养技术可以模拟人体内的生理环境，用于研究细胞与细胞之间、细胞与细胞间质之间的反应等。此外，皮肤细胞培养技术可以用来做毒性分析，也可以进行功效评价，是保证化妆品安全、有效的必要手段，为皮肤生理学等提供了技术基础。以下对常用于化妆品功效评价的几种皮肤类型进行简要介绍。
人永生化角质形成细胞（HaCaT细胞）
角质细胞（KC细胞）的体外培养技术已经十分成熟，其生长较快、细胞存活率较高，但同时也易老化且传代次数较少，所以在化妆品功效评价中通常会使用HaCaT细胞（即非肿瘤来源的永生化人正常皮肤的KC株，其与KC分化特性相似，具有易于培养、传代次数多的优点）。
HaCaT细胞可应用于保湿功效评价。HaCaT细胞可以合成透明质酸（HA）、水通道蛋白（AQP）、紧密连接蛋白（TJP）以及丝聚蛋白（FLG）等与皮肤保湿相关的生物分子。因此，可以通过检测化妆品原料对HaCaT细胞中AQP、claudin-1（TJP中形成表皮细胞旁屏障的主要跨膜蛋白）和FLG等保湿相关蛋白含量的影响来反映其保湿能力，从而对保湿化妆品进行功效评价。
不过，现在进行保湿功效测试一般会通过人体试验的方法，这样会更直观，而HaCaT细胞测试可用于研究原料的保湿机理。
HaCaT细胞还可应用于抗氧化功效评价。活性氧（ROS）过量会对脱氧核糖核酸和蛋白质产生氧化损伤；丙二醛（MDA）是生物体内自由基作用于脂质发生过氧化反应的最终产物。因此，通过检测其中HaCaT细胞内ROS和MDA的含量变化可以反映出细胞内氧化应激的水平，以评价化妆品原料的抗氧化能力。
超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）可以用于清除或降低氧自由基造成的损伤。通过检测SOD、CAT和GSH-Px的活力，能反映出化妆品原料对HaCaT细胞内自由基清除能力的影响，以评价化妆品原料的抗氧化能力。
小鼠黑素瘤B16细胞
黑素细胞是皮肤内的一种特殊细胞，它位于表皮的基底层，细胞内的黑素小体能合成黑素，并转移到周围的角质细胞中，为皮肤提供颜色。但是黑素细胞增殖比较缓慢，所以常用小鼠黑素瘤B16细胞（以下简称B16细胞）代替黑素细胞来进行细胞实验。B16细胞的基本结构与黑色素合成功能方面与人黑素细胞基本相同，且增殖能力更强，能够多次传代，适合用于实验研究。
B16细胞可应用于美白功效评价。有研究人员研究了壬二酸对人黑素细胞和B16细胞黑素合成功能的影响。与空白对照组比较，0.1mmol//L的壬二酸即显示抑制人表皮黑素细胞的酪氨酸酶活性和黑素合成，同等浓度的壬二酸对B16细胞的酪氨酸酶活性和黑素合成也有抑制作用。
人皮肤成纤维细胞
人皮肤成纤维细胞是皮肤真皮层中最主要的细胞，对于维持皮肤的弹性和张力具有重要作用。人皮肤成纤维细胞具有很强的蛋白质合成能力，可以合成并分泌大量弹性蛋白、胶原蛋白、糖胺多糖和糖蛋白等基质成分，进而生成弹性纤维、胶原纤维和网状纤维，分泌多种细胞修复因子，使皮肤具有强大的更新与自我修复能力。
人皮肤成纤维细胞可应用于抗衰老功效评价。有研究人员研究了白藜芦醇对UVB照射的人皮肤成纤维细胞基质金属蛋白酶（MMP-1）水平及细胞凋亡的影响，即白藜芦醇对紫外线照射皮肤的光保护作用。结果表明，白藜芦醇能通过抑制UVB照射所造成的人皮肤成纤维细胞MMP-1水平增长，使皮肤真皮组织胶原蛋白的分解减少，从而延缓紫外线照射对皮肤造成的损伤和老化进程。
人角质形成细胞（HKC）
HKC是一种能合成角质蛋白的上皮细胞，此类细胞为表皮的主体，由表皮深层开始逐渐增殖、分化，并不断向表层移行，表皮最深层为基底层，向上依次为棘层、颗粒层、角质层，角质蛋白也依生长层次逐渐合成。
HKC是表皮中最重要的细胞之一，它可以反映表皮的健康状态，所以有大量研究人员将它应用于化妆品原料的研究与应用。例如有研究人员通过实验证实阿魏酸是通过影响HKC下游炎症因子，如肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素-8（IL-8）分泌，从而参与调节免疫反应的信号传导机制，以保护HKC。